2.3.4.1 Desinfección del ex plante

Ápices caulinares de cuatro cultivares de caña de azúcar. 'V 64-10',86749, 'PR 61632' y PR 62258', fueron sometidos a diferentes procesos de desinfección antes de ser sembrados in vitro, con la finalidad de establecer un material completamente aséptico durante los experimentos. Para ello, inicialmente, se sumergieron los explantes en soluciones al1,4, 8,10 y 20 % de hipoclorito de sodio (NaCI0), por un período de 20 minutos. Como solución mineral se utilizó la ideada por Murashige y Sko09 (MS" suplemantada con tiamina-HCI (0,1 mg/l), píridoxina (1 mg/l), ácido nicotínico (1 mg/l) mioinositol (100 mg/), sacarosa (3%) y sustancias de crecimiento variables para cada cultivar. Al principio, la contaminación fue un factor negativo para el normal desarrollo de los explantes; por ello se tomó la alternativa de someter los explantes a baño de maria a 50°C por lapsos diferentes de tiempo (0, 10, 20, 40 y 60 minutos). El material tomado en la estación lluviosa, consistentemente presentó una mayor contaminación en relación con aquel seleccionado durante la estación seca. Los mejores resultados se observaron al colocar el material vegetal en baño de maria a 50°C durante 60 minutos e inmediatamente sumergirlo en una solución de hipoclorito de sodio al 10%, para luego ser sembrado in vitro, bajo condiciones de asepsia. Paralelamente se trabajó con diferentes tamaños de explantes, encontrándose que la contaminaci6n aumentaba a medida que el tamaño del explante era mayor, resultando más apropiados los explantes de tamaño entre 0,5 y 1,0 milímetros

http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_ci/canadeazucar/cana0602/texto/metodos.htm